1. 單波長單光束分光光度計是一類結(jié)構(gòu)簡單，使用、維護(hù)比較方便，應(yīng)用廣泛的分光光度計。其設(shè)計原理和結(jié)構(gòu)具有以下特點(diǎn)：①單光束光路，從光源到試樣至接收器只有一個光通道，使用中依次對參考樣品和待測試樣進(jìn)行測定，然后將二次測定數(shù)據(jù)進(jìn)行比較、計算，獲得終結(jié)果；②儀器只有一個色散元件，工作波長范圍較窄；③通常采用直接接收放大顯示的簡單電子系統(tǒng)，用電表或數(shù)字顯示；④結(jié)構(gòu)簡單、附件少、功能范圍小，不能做特殊試樣如渾濁樣品、不透明樣品等的測定。

 

2.單光束分光光度計檢測的準(zhǔn)確性不夠穩(wěn)定，不能用于精密分析。雙光束分光光度計的光路設(shè)計在其出射狹縫和樣品吸收池之間增加了一個光束分裂器或斬波器，作用是以一定的頻率將一個光束交替分成兩路，使一路經(jīng)過參比溶液，另一路經(jīng)過樣品溶液，然后由一個檢測器交替接收或由兩個匹配器分別接收兩路信號。這是目前國內(nèi)外使用多，性能較為完善的一類分光光度計。原理和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：①從光源到檢測器有試樣光路和參考光路兩條通路，可同時對檢測樣品和參考樣品進(jìn)行測定，直接獲得檢測數(shù)據(jù)，還可自動補(bǔ)償檢測時因條件的隨機(jī)變化（如溫度變化、電源電壓波動、放大器增益變化、儀器掃描、記錄系統(tǒng)的間隙變化等）或樣品中非測定組分的干擾所引起的影響，比單光束分光光度計使用更方便、準(zhǔn)確；②一般采用兩個光柵或棱鏡加光柵的雙單色器，能有效地提高分辨率和降低雜散光；③可以自動進(jìn)行波長掃描、自動記錄光譜曲線，也可以外接計算機(jī)，實現(xiàn)自動化運(yùn)行；④可裝備各種附件，光、電、機(jī)緊密結(jié)合，功能范圍寬。

 

3.雙波長分光光度計能較好的解決由于非特征吸收信號（如試樣的渾濁、吸收池與空氣界面以及吸收池與溶液界面的折射差別等）影響而帶來的誤差。其基本原理是從同一光源發(fā)出的光分為兩束，分別經(jīng)兩個單色器分光后得到兩束不同波長（λ1，λ2）的單色光，經(jīng)斬光器使兩束光以一定頻率交替照射同一樣品，然后經(jīng)過檢測器顯示出兩個波長下的吸光度差值（ΔA=Aλ1-Aλ2）。

 

只要λ1、λ2選擇適當(dāng)（被測物在一個波長上有大吸收峰，在另一個波長上沒有吸收或很少吸收；而非被測物在兩個波長上的吸收是相同的），ΔA就是消除了非特征性吸收干擾（即扣除了背景吸收）的吸光度值。這樣即可自動扣除背景的影響。雙波長分光光度計不用參比溶液，只用一個待測溶液，大大提高了檢測的準(zhǔn)確度。